PORTADA

INSTITUTO TECNOLÓGICO 
DE CD ALTAMIRANO

LIC: BIOLOGÍA

ASIGNATURA:
BIOTECNOLOGÍA APLICADA

“FORMAS DE DESCONGELACIÓN EN LA 

TÉCNICA DE CRIOCONSERVACION”

NOMBRE DE LA ALUMNA:
ALEXA MOLINA VALENZUELA

VIII  SEMESTRE “A”

NOMBRE DEL PROFESOR:
FRANCISCO JAVIER PUCHE ACOSTA

CD.ALTAMIRANO, GRO.   MAYO/2013

CONCLUSIÓN FINAL DE LA UNIDAD NUMERO 2

Como conclusión final, puedo decir y afirmar que se cumplió con todos los temas mencionados en el temario, se cumplió con el objetivo de poder aprender todos esos puntos. Aprendimos de forma generalizada que es un medio de cultivo, y la técnica de medio de cultivo

En esta unidad también conocimos y aprendimos principalmente las áreas con las que cuenta un laboratorio de cultivos vegetales y el material y equipo que se encuentren dentro de él. Partiendo de ahí, conocimos y lo pusimos en práctica en el laboratorio todo lo relacionado con la técnica de cultivo de tejidos vegetales, sus generalidades principales, sus componentes, aprendimos a prepararlos, y repasamos el tipo de esterilización que se usa en esta técnica y los demás tipos de esterilización existentes así como los factores que influyen en ella, en la práctica de siembra aprendimos a como sembrar un explante, que condiciones necesita para que este crezca adecuadamente, las condiciones de incubación que esta presenta, y los cambios fisiológicos que desarrolla.

De los inconvenientes que tuve en esta unidad, fue un poco en cómo hacer los cálculos para preparar los medios de cultivo, puesto que se me dificulta un poco trabajar con número y demás  Pero es cuestión de practicar para aprender a realizaros de una mejor manera.

A manera futura esta unidad me va a servir para las demás unidades que siguen, pues van relacionadas y así mismo voy a poder relacionar conceptos nuevos con los anteriores. 

2.3.7 TRASPLANTE AL SUSTRATO

Las plántulas recién enraizadas son sensibles a los cambios ambientales y esto va a depender del éxito o el fracaso. En esta etapa las plantas sufrirán cambios de diferente tipo que permitirán la adaptación de las mismas a vivir en condiciones naturales.

En el momento en que se extraen los explantes enraizados de los frascos, están poco adaptados a crecer en un invernáculo, ya que estos explantes han enraizado y crecido en ambientes con una humedad relativa muy elevada y generalmente tienen estomas (estructuras responsables de regular la transpiración y pérdida de agua en la planta) que no son completamente funcionales frente a descensos de la humedad relativa, y por lo tanto demasiado lentos para evitar la desecación del explante.

Crecer en ambientes tan húmedos también suele implicar la falta de una cutícula con cera bien desarrollada, que representa la barrera física para evitar la pérdida de agua a lo largo de toda la superficie de la planta.

De acuerdo a los apuntes realizados en clase, cabe mencionar que el trasplante de una plántula in vitro a campo debe ser mediante aclimatación, mediante el cual este proceso dura regularmente entre 4 y 8 semanas consistiendo en el endurecimiento y sobre todo en la adaptación de la plántula al campo, lo cual debe ser paulatinamente y secuencialmente. 

Los pasos son los siguientes:

2.3.6.- CAMBIOS FISIOLÓGICOS DEL EXPLANTE

Algunos de los cambios fisiológicos que presentan los explantes son los siguientes:

§  Estomas atrofiados, no son funcionales al 100%.

§  Cutícula más delgada y con aberturas.

§  Parénquima desorganizado, no están unidas, es decir, es ineficiente.

§  Con menos luz y azúcar en las plantas se realiza menos fotosíntesis y en gran porcentaje son heterótrofas y en poco porcentaje son autótrofas.

§  Como tienen mucha humedad relativa las raíces son más delgadas, pocas raíces y no son funcionales.

§  No realiza fotosíntesis.

§  Crecimiento en condiciones controladas.

§  Crecimiento en condiciones de asepsia.

§  Estomas no funcionales ya que no cierran y por lo tanto el agua se escapa.

§  Ausencia de pelos radiculares tienen raíces delgadas que solamente son funcionales en el frasco.

§  Ausencia de cera en la cutícula.

2.3.5 CONDICIONES DE INCUBACIÓN

Las condiciones de incubación para el establecimiento de un cultivo de tejidos vegetales deben ser estrictas, esto para que la planta pueda desarrollarse y crecer exitosamente, aprovechando la gama de nutrientes que se encuentran en el medio donde esta se estableció. 
Las condiciones afectan directamente tanto a los cambios fisiológicos del explante como al trasplante de plantas in vitro al sustrato.
Entre esas condiciones las más importantes son:

2.3.4 SIEMBRA DEL EXPLANTE

Después de esterilizar los medios MS y los materiales que se utilizaran se procede a la siembra de explantes en la cámara de flujo laminar, la cual se desinfecta con anterioridad para evitar contaminación del medio.

Se lavan  bien las manos con agua y con jabón para después desinfectar con alcohol de 96° y  se meten en la cámara de flujo laminar mientras alguien más corta los explantes para después llevarlos a la cámara de flujo laminar en un frasco, al que se le coloca la mitad de agua destilada y la otra mitad de cloralex, esto para desinfectar a los explantes se dejan desinfectando durante 5 min, después se hacen dos lavados  el primero de un minuto y el segundo de 5 minutos. Se coloca el mechero de alcohol encendido en la cámara de flujo laminar, en un frasco vacío estéril se colocan las pinzas y el bisturí  los cuales se estarán desinfectando cada vez que se ocupen, la desinfección se realiza remojando el material (pinzas y bisturí) en alcohol de 70° y después exponerlo al fuego directo y se coloca en el frasco vació para continuar con la siembra.

Para la siembra se corta la orilla inferior del explante ya que con el cloralex se quema y muere una pequeña porción del explante, se toma con las pinzas desinfectadas para depositarlo en el frasco con el medio MS este frasco se destapa y se mantiene la tapadera entre los dedos al igual que el frasco sin tocar el interior de ambos, sin meter los dedos en el interior del frasco se coloca el explante sobre el medio de cultivo tratando de que este quede poco sumergido y con la punta hacia arriba.

Una vez terminada la siembra se tapan y sellan los frascos para ser llevados al área de crecimiento. 

2.3.2 SELECCIÓN DE PLANTAS MADRES

La selección de las plantas madres depende de varios factores:

Edad: Entre más jóvenes sean, son mejores.

Posición de la planta: Los explantes deben ser ubicados en la parte superior tercio medio y superior.

Estado fenológico de la planta: El estado vegetativo es el más adecuado

Sanidad y Nutrición: Las plantas deben estar sanas y deben de ser vigorosas.

Tipo herbácea y leñosa: Las plantas herbáceas son las mejores, las plantas leñosas necesitan medios especiales. 

2.3.3 EXPLANTE

Los explantes son de diversa naturaleza, pueden ser porciones de tejido, células sueltas, protoplastos, esporas, granos de polen o semillas. El tipo de explante a usarse en los procesos de micropropagación depende de la especie con la que se esté trabajando y de los objetivos que se persigan. Explantes como los meristemos apicales y las yemas axilares son genéticamente muy estables, este tipo de explantes sirve para reproducir múltiples clones de una forma o variedad con características especiales que se desea mantener en el cultivo.

Una vez que se ha obtenido el explante, este debe ser correctamente desinfectado para evitar la proliferación de contaminantes biológicos (bacterias, hongos y levaduras principalmente) en el medio, los cuales afectan el crecimiento y desarrollo del explante y compiten con el mismo deteriorándolo y haciéndolo inservible para cultivo.