La crioconservación es
el proceso en el cual células o tejidos son congelados a
muy bajas temperaturas, generalmente entre -80 ºC y -196 ºC que es el punto
de ebullición del nitrógeno líquido para disminuir las funciones
vitales de una célula o un organismo y poderlo mantener en condiciones de vida
suspendida por mucho tiempo.
La preservación de material biológico a temperaturas
criogénicas consigue detener completamente las reacciones biológicas, lo que
permite el almacenamiento indefinido del citado material.
Gracias a la criobiología, los procesos de crioconservación pueden controlarse
de forma que el daño que sufran las células sea mínimo y, por tanto, la
recuperación sea máxima.
La congelación incontrolada de células puede producir la formación de hielo
intracelular o daños osmóticos, pero existen diversas formas para intentar
evitar estos daños. La más eficiente es la congelación controlada mediante
congeladores programables alimentados por nitrógeno líquido.
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Hay una gran
variedad de materiales biológicos que se crioconservan para ser utilizados
posteriormente.
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* Médula ósea
* Tendones * Córneas * Linfocitos * Paratiroides * Hematíes * Hepatocitos |
* Plaquetas
* Piel * Embriones * Válvulas cardíacas * Ovocitos * Arterias y venas * Tejido ovárico |
* Semen
* Tráquea * Huesos * Uretra * Cartílagos * Placenta * Condrocitos |
Todos estos materiales tienen en común que son células individuales o
tejidos en los que la administración de crioprotectores y el cambio de
temperatura de todo el material puede hacerse de manera homogénea. Este no es
el caso de órganos o miembros completos, porque la variedad de tejidos y tipos
celulares que integran los mismos impide la utilización de la congelación
idónea para todos los tipos a la vez.
Para hacer posible dicha técnica, existen diversas
formas para realizarlo, es a través de 6 pasos o etapas que se deben seguir al
pie de la letra:
1. Los embriones seleccionados deben perder agua
progresivamente. Además, también deben contactar con sustancias
crioprotectoras. Protegen estabilizando la membrana. Además, también bajan el
punto de congelación del embrión.
2. Enfriar el embrión
asegurándote que el medio extracelular congela de forma segura la inducción
de cristalización extracelular añadiendo
cristales de hielo a –5/-7ºC.
3.Enfriar el embrión de forma
lenta y progresiva a –0’2ºC / minuto a –0’5 ºC / minuto con aparatos caros
hasta –40 ºC. Puede durar hasta 3 horas. Tienen una capacidad limitada.
4. Se almacena a –196 ºC en
N2 líquido de forma indefinida. La temperatura de la fase líquida es
económica para tener bajas temperaturas porque es una forma fácil de
tenerla.
5. Se debe descongelar cuando
se quiere usar. La tasa de descongelación depende mucho de la temperatura a la
que se parado el enfriamiento. Si se para a –80 ºC, la descongelación debe ser
lenta para que pueda recuperar su volumen de forma lenta y progresiva. Si se
para a –40ºC, se sabe que hay muy pocos cristales pequeños intracelulares que
no matan el embrión y se debe aplicar una descongelación rápida para que crezca
por nucleación y evitar que puedan crecer los cristales dentro del embrión.
6.Se debe eliminar el crioprotector dentro del embrión. Hoy día se están descubriendo procedimientos
que rompen con el enfriamiento lento y progresivo. El método convencional es de
equilibrio. Los métodos de no equilibrio o vitrificación exponen los embriones
a unas concentraciones de solutos tan altas que cuando se disminuye la
temperatura, la viscosidad es tan grande que no cuenta, sino que vitrifica
hasta que queda sólido sin cristalizar a las moléculas quedan paradas
sin cristalizar.
Bibliografia:
http://canal-h.net/webs/sgonzalez002/Manipulacion/CRIOCONSERVACION.htm
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