El desarrollo del cultivo in vitro de tejidos vegetales a
permitido el establecimiento de nuevos métodos de propagación en especies de
reproducción vegetativa y ha contribuido a complementar los trabajos de
mejoramiento genético en diferentes especies. Además de ofrecer nuevas
alternativas para la conservación ex situ del germoplasma. La conservación in
vitro puede aplicarse en especies donde se encuentran establecido un sistema de
regeneración de plantas. El método de conservación in vitro más
generalizado es el denominado “crecimiento mínimo”. Se basa en modificaciones
de las condiciones óptimas de cultivo con el objeto de disminuir el crecimiento
vegetal. De esta manera, se puede reducir la frecuencia de trasferencia de las
plantas a medios de cultivo fresco. Recientemente la conservación de
germoplasma de plantas está implicando la inmersión directa dentro de nitrógeno
líquido y el procedimiento de vitrificación ha demostrado ser el más prometedor
entre ellos. El mismo ha sido empleado por numerosos investigadores en diferentes
especies. La crioconservación garantiza la conservación in vitro del germoplasma
durante periodos prolongados de tiempo.
3.5.1 REGENERACIÓN
La regeneración de plantas enteras basadas en los sistemas
de cultivo de células es, a menudo el paso que limita la aplicación de técnicas
de cultivo in vitro a especies vegetales que no se pueden propagar mediante
meristemos preformados. A pesar de la capacidad que tienen para iniciar callo
diversos tejidos y órganos de muchas especies cultivadas, la regeneración
reproducible de plantas enteras sigue siendo problemática. La regeneración
adventicia mediante la embriogénesis somática es muy deseable, ya que el
proceso ofrece altas tasas de multiplicación y produce propángulos que poseen
ejes de raíz y de yema. Los embriones somáticos pueden desarrollarse de células
únicas y se pueden recuperar plantas con genotipos más estables.
3.5.1.2 VARIABILIDAD
La evaluación de la viabilidad de los cultivos in vitro se
debe realizar sistemáticamente. En condiciones de crecimiento lento, en que el
periodo de trasferencia se extiende durante meses o años, la frecuencia de
evaluación de los cultivos aumenta en comparación con la evaluación que se
haría al material conservado bajo nitrógeno líquido, por ejemplo. Las
características más importantes que se evalúan en el almacenamiento de
crecimiento lento de cultivos derivados del ápice de yemas son: contaminación,
senescencia de la hoja, numero de brotes verdes, numero de nudos viables en
relación con la longitud del tallo, presencia o ausencia de raíces y ocurrencia
de callo.
3.5.1.3 ESTABILIDAD
GENÉTICA
La estabilidad genética de los cultivos ha sido, durante
mucho tiempo un motivo de inquietud cuando se piensa aplicar las técnicas in
vitro para la conservación del germoplasma. El material recuperado de la
conservación in vitro debe representar genéticamente al material utilizado.
Cualquier sistema de cultivo in vitro será inaceptable si introduce un alto
riesgo de inestabilidad genética o de selección entre genotipos o de ambas
cosas. En cultivos propagados vegetativamente se han aplicado criterios
morfológicos para caracterizar los genotipos, diferencias que son
difíciles de detectar en los cultivos propagados in vitro. Se ha señalado que
la variación genética causada por un reajuste cromosómico puede presentarse en
el cultivo de tejido. Existe también una correlación entre el tiempo en que el
material vegetal se cultiva como callo y la probabilidad de que ocurran en el cambios
cromosómicos; esto podría causar un cambio hacia un tipo de variante en la
propagación in vitro.
3.5.1.4 ESTRATEGIAS
Es grande el rango de especies
vegetales cultivadas cuya conservación es accesible a las técnicas in vitro. La
conservación de los recursos filogenéticos mediante lso métodos de cultivo in
vitro se logra haciendo cambios en el ambiente de cultivo para desacelerar o
suprimir totalmente el crecimiento de las células y de los tejidos; el objetivo
es aumentar al máximo el periodo de trasferencia del cultivo o extenderlo
indefinitivamente. No obstante, debe realizarse una evaluación científica
cuidadosa de las ventajas y desventajas de una estrategia in vitro de la
conservación de recursos genéticos para cada caso especifico. Se han propuesto
2 tipos de conservación in vitro de los bancos genéticos:
1) Banco
genético in vitro activo (IVAG, en ingles): donde los cultivos se
mantienen en crecimiento lento. Se esta desarrollando en alto grado, para las
especies yuca, papa, plátano, caña de azúcar y constituye una colección de
trabajo; su contraparte estaría representada por la colección de campo y por la
colección se semilla sexual almacenada a corto plazo.
2) Banco
genético in vitro básico (IVBG, en ingles): donde los cultivos son
crioconservados. Constituye una colección básica, es decir, conservada en
plazos largos y no activa o de trabajo, ya que la criopreservacion no se ha
desarrollado aun plenamente en ningún cultivo; este banco permite un
mantenimiento total d ela estabilidad genotípica del germoplasma, y su
contraparte estaría representada por la colección de semilla sexual mantenida
bajo almacenamiento a largo plazo.
Bibliografia:
“CULTIVO DE TEJIDO VEGETAL” de Roca W.M. y Mroginski
L.A. Capitulo 31, pagina 700
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